李润琴 黄 春.SD新生大鼠c-kit阳性心肌细胞的分离纯化[J].,2014,(18):15-18 |
SD新生大鼠c-kit阳性心肌细胞的分离纯化 |
Separationandpurificationofc-kit+ myocardialcellsinSDnewbornrats |
修订日期:2014-07-04 |
DOI: |
中文关键词: 【关键词】新生大鼠 c-kit阳性心肌细胞 分离纯化 |
英文关键词: Keywords:Newbornrats c-kit+ myocardialcells Separationandpurification |
基金项目:基金项目:重庆教委科学技术研究项目(KJ101804)。 |
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中文摘要: |
【摘 要】目的:建立新生SD大鼠c-kit阳性细胞分离纯化及传代的培养方法。方法:取出生24h之内新生SD大鼠心尖部组织,
用PBS液洗去心尖部的血液,将其剪碎成lmm3以下的组织块培养,培养48h后,05%Trypsin-EDTA消化,用免疫磁珠分选c-kit阳性
的心肌细胞,继续培养传代。用倒置显微镜观察c-kit阳性心肌细胞,用免疫细胞化学法检测心肌组织特异性cTnT及Desmin蛋白。结果:
用心脏组织培养法成功得到了体外搏动的原代心肌细胞;用免疫磁珠分选了c-kit阳性心肌细胞,倒置显微镜下观察到c-kit阳性心肌细
胞具有传代增殖的特性;同时,检测了c-kit阳性心肌细胞胞质cTnT及Desmin结合蛋白的阳性表达。结论:采用改良后的培养方法获得
了c-kit阳性心肌细胞,该细胞具有心肌干细胞的蛋白表达特性,并具有一定的传代增殖能力。 |
英文摘要: |
objectiveToestablishamethodaboutseparation,purificationandpassageofc-kit+myocardialcellsinSDnewborn
rats.MethodCardiacapexthatremovedfromnewbornSDratwithin24hourswashedbyPBS,andcutitaboutlmm3,cultivateafter
48hours,05% Trypsin-EDTAdigestion,c-kit+ myocardialcellsseparatedbypositiveimmunemagneticbead,continuingsub
culture.Toobservethec-kit+ myocardialcellgrowth,andimmunocytochemistrydetectionofcTnTandDesminprotein.Results
Pulsatileprimarycardiomyocytesinvitrohavebeensuccessfullygottenwithcardiactissueculturemethod;c-kit+ myocardialcells
haveseparatedbypositiveimmunemagneticbead,Thepassagedproliferationcharacteristicsofc-kit-positivecardiaccellshavebeen
detectedinaninvertedmicroscope.Meanwhile,thepositiveexpressionofcTnTandDesmininthecytoplasmicofc-kit-positive
cardiaccellshavebeendetected.ConclusionC-kit+ myocardialcells,withtheproteinexpressioncharacteristicsofmyocardialstem
cellandtheproliferationability,havebeenobtainedbythecultivationoftheimprovedmethod. |
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